L-脯氨酸有两种制法。一是直接发酵法，利用葡萄糖和黄色短杆菌变异株或谷氨酸棒杆菌野生株，经微生物发酵获得L-脯氨酸；二是化学合成法，以谷氨酸为原料，与无水乙醇在硫酸催化下发生酯化，并加入三乙醇胺将氨基硫酸盐游离出来，得谷氨酸-δ-乙酯。再用金属还原剂硼氢化钾还原谷氨酸-δ-乙酯，得脯氨酸粗品，最后对其分离纯化可得粗制脯氨酸。小试工艺酯化称取L-谷氨酸147g,投入三颈瓶中，加入无水乙醇1L，搅拌冷却至0℃,再滴加H2SO480ml,于0-5℃搅拌反应1h,室温继续反应1h,反应全部变清。在20℃下Chemicalbook滴加三乙胺至pH为8-8.5,析出白色结晶，在室温下再搅拌1h,静置冷却5℃过滤，取结晶，用95%乙醇洗涤，抽干后真空干燥，得谷氨酸-δ-乙酯约141g。熔点178-180℃,收率80%-83%。[α]32D+29.8(C=1g/ml10%HCl)。还原在三颈瓶中投入谷氨酸-δ-乙酯175g，加入蒸馏水875ml,搅拌冷却至5℃,再分次加入KBH453.9g,约1h加完，室温再反应1h,保温50℃反应3h。冷却至0℃，加入6mol/LHCl调至pH4,过滤取滤液，即得粗品L-脯氨酸水溶液。分离纯化