由各种富含L-天冬氨酸的蛋白质，用酸水解后用氢氧化钙中和，得L-谷氨酸与L-天冬氨酸的钙盐，然后分离而得。用酶使氨加成至富马酸而得，得率高。由糖类经大肠杆菌发酵而得。生产方法左旋天冬氨酸的制法有合成法和发酵法。1.合成法主要是以马来酸或富Chemicalbook马酸或它们的酯为原料，在加压下用氨处理，然后水解。较容易合成得到外消旋天冬氨酸，但至今还没有理想的拆分外消旋体的方法。2.发酵法在酶作用下，将富马酸与氨加成，可高收率地得到产品。采用这种方法只生成左旋体，收率高，因此是工业生产的主要方法。

菌种培养大肠杆菌(Eschrichiacoli)Asl．881的培养。普通肉汁培养基为斜面培养基，插瓶培养基其组成为：玉米浆7.5％，延胡索酸2.0%，MgSO4·7H2O0.02%将溶液用氨水调pH至6.0，煮沸过滤后，与500ml锥形瓶中装入培养基5Chemicalbook0-100ml。取新鲜斜面上或液体中的培养种子，接种与摇瓶培养基中，于37℃下振摇培养24h，逐级扩大培养至1000-2000L规模后，用1mol/L的HCl调pH至5.0，保温45℃1h后，冷却至室温，于转筒式高速离心机内离心，收集含有天冬氨酸酶的菌体。