一种耐高温酶法合成菊粉的方法，其利用出芽胞杆菌为发酵菌种生产耐高温菊粉合成酶，然后再利用耐高温菊粉合成酶根据需要生产不同DP值菊粉，该方法的步骤为：⑴、培养出芽胞杆菌生产耐高温菊粉合成酶：发酵原料经高温灭菌后打入种子罐及发酵罐中，出芽胞杆菌TKB28菌株经过摇瓶、种子罐的二级接种后，按5%接种量接入发酵罐中，通入无菌空气搅拌条件下，37℃恒温发酵16小时左右，然后通过离心将菌体和发酵液分离，通过分子量20000的超滤膜浓缩菊粉合成酶溶液，测定所得菊粉合成酶浓缩液的酶活；发酵原料包括：蔗糖200g；蛋白胨50g；无机盐2g。蔗糖为碳源，蛋白胨为有机氮源，辅以少量无机盐类形成发酵原料。⑵、合成菊糖反应：在底物浓度为20%的蔗糖溶液、温度为70℃条件下，按1?1.5U/mL的加入量加入高温菊粉合成酶，初Chemicalbook期pH值5.5，保温8小时后当蔗糖浓度小于5%时，调节pH为7.0，同时通过流加蔗糖使蔗糖浓度维持在5?10%，12小时后停止流加；当反应进行4小时后溶液中主要为DP值9－12的菊糖和葡萄糖及少量蔗糖，当12小时后反应结束，溶液中主要为DP值21－25的菊糖和葡萄糖；⑶、除杂与制粉：反应结束后的溶液通过微滤、离子交换树脂除去料液中的少量不溶物、灰分、和色素，然后通过纳滤膜去除葡萄糖及少量蔗糖，使菊粉的纯度在95%以上，最后通过喷雾干燥制得高纯度菊粉。⑷、步骤⑵合成菊糖反应进行4小时后结束反应，将所得反应溶液进行步骤⑶除杂与制粉，得到DP值9－12、纯度在95%以上的菊粉。⑸、步骤⑵合成菊糖反应进行12小时后结束反应，将所得反应溶液进行步骤⑶除杂与制粉，得到DP值21－25、纯度在95%以上的菊粉。