菌种培养种子培养基组成为葡萄糖2%，尿素0.3%,玉米浆2.5%，豆饼水解液0.1%(以干豆饼计)，调pH6.5,保温118-120℃，灭菌30min。一级种子培养。在1000ml锥形瓶中加入上述培养基200ml,接种一环牛肉膏斜面AS（即α-乙酰乳酸合成酶）1.998菌种,30℃培养,冲程7cm,频率105次/min,16h。二级种子培养。二级种子培养基和一级种子培养基相似，另加菜籽油0.4%，接种量3.5%，培养8h，如此逐级放大培养足够量的菌种。发酵、酸化发酵培养液是由硫酸铵4.5%,豆饼水解液0.4%，玉米浆2.0%,碳酸钙4.5%,调pH至7.2，淀粉水解还原糖初糖浓度11.5所组成的。然后在5m3发酵罐中添加上述发酵培养液3t，加热保温118-120℃，控制压力1.1×105Pa，灭菌30min后，立即通冰盐水冷却至25℃，接入1%菌种，以180r/min转速搅拌保温30-31℃，以0.21L/min通气量发酵6Chemicalbook0h，在24-50h之间不断添加尿素至0.6%，氨水至0.27%。待发酵60h后，将发酵液加热至100℃，并保持10min。冷却后过滤，除去菌体，滤液加工业用硫酸铵和草酸至pH3.5,过滤取滤液。分离、浓缩将上述滤液以每分钟树脂量1.5%的流速流过氢型732离子交换树脂(400mm×1000mm)后，再用100L去离子水洗涤树脂柱，最后以60℃，0.5mol/L的氨水，按3L/min的流速进行洗脱，并分步收集洗脱液。合并pH为3-12的洗脱液于70-80℃减压蒸馏浓缩至黏稠状。再加去离子水至原体积的1/4，再浓缩至黏稠状，赶氨，如此反复三次。脱色、浓缩、中和将上述浓缩黏稠物加去离子水至原体积的1/4，搅拌均匀，并加2mol/L的HCl调pH至3.5，再加入1%的活性炭，于70-80℃保温搅拌脱色1h,过滤取滤液减压浓缩，最后加入2mol/L的HCl调pH至6.0，保温5℃，静置沉淀过夜，抽滤取沉淀于105℃下洪干，得半成品。