称取试样约750mg，移入一干燥的200ml锥形烧瓶中，加冰醋酸75ml，在加热板上加热溶解后冷却，加喹哪啶红试液(TS-203)数滴，用0.1mol/L高氯酸的冰醋酸溶液经10ml微量滴定管滴定至无色终点。每ml0.1mol/L高氯酸相当于葡萄糖酸钠(C6H11NaO7)21.81mg。

工业上一般以含有葡萄糖的物质(例如谷物)为原料，采用发酵法先由葡萄糖制得葡萄糖酸，然后再由氢氧化钠进行中和，即可得葡萄糖酸钠，也可采用电解法和氧化合成。我国大都采用化学氧化法-次溴氧化法生产合成。

根据所用发酵酶种类的不同，发酵法可分为两钟，一种是用Aspergillus Niger的酶，另一种酸，后一法则借助于葡萄糖脱氢形成内酯，然后使酯分解。

葡萄糖酸钠也可直接由葡萄糖发酵而得。此时，发酵基持的组成可为：葡萄糖250~350g/L，七水硫酸镁0.2~0.3g/L，磷酸氢二铵或尿素0.4~0.5g/L。 此基质须进行灭菌处理。发酵过程中，温度控制为30-32度，pH用30%~50%氢氧化钠的办法控制为5.5-6.5，发酵过程持续40~100h。然后，通过过滤和洗涤除去微生物，活性炭脱色，再过滤，浓缩结果或喷雾干燥而得成品。