取1ml被测液于10ml容量瓶中, 加入2ml 2, 4-二硝基苯肼试剂, 摇匀, 塞上塞子,在50℃时加热50分钟, 冷却, 加入氢氧化钾的甲醇液至刻度, 摇匀, 静置2分钟。取1ml此液于离心试管中, 加入20ml甲醇, 摇匀, 离心。将红棕色上清液倒入50ml的容量瓶中, 残渣再加入20ml甲醇离心, 合并上清液, 用甲醇稀释至刻度。

精密吸取1ml甲醇置10ml容量瓶中, 从“加入2ml 2, 4-二硝基苯肼试剂”起同法操作, 作为空白对照。

以空白溶液为对照,在490nm处测定被测浓度的吸光度A值,以E=537计算水飞蓟素的含量。

3.分光光度法测定水飞蓟素的含量(德国药典DAB-9版1997)

标准溶液的制备:精密称取水飞蓟宾标准品25mg,置于5ml容量瓶,加甲醇溶解并定容至刻度,即得浓度为5mg/ml的标准品溶液。

样品溶液的制备:称250mg的水飞蓟素至50ml容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,备用。