检测: 分别将1.0ml的标准制备液和样品制备液加入2个琥珀色的10ml烧瓶中, 准确标记, 分别加入2ml的试液, 混合。塞上瓶塞, 保持在50±1℃, 缓慢搅拌50分钟。冷却, 用甲醇稀释溶液至刻度, 混合。分别取上述溶液2.0ml, 移至一100ml烧瓶中, 并加入3.0ml的羟化四氢铵甲醇溶液 (25%) [注意: 羟化四氢铵临时配制, 透明、无色溶液]。用甲醇稀释至刻度, 使烧瓶静置30分钟。同时在1cm吸收池、490nm处测定标准制备液和样品制备液的吸收度, 甲醇溶液作空白, 并用以下公式计算水飞蓟宾和水飞蓟素的百分含量:

5000(C/W) (Au/As)

C: 为标准溶液中水飞蓟宾的浓度 (mg/ml); W: 样品制备液中所用干燥水飞蓟的重量 (mg); Au和As分别为样品制备液和标准制备液的吸收度。

5. HPLC法测定水飞蓟素的含量 (INA法)

色谱条件: 柱: YMC-Mark ODS C18 5u 4.6×150mm(或Phenomenex Luna C18 5u 4.6×150mm); 流动相: A液: 5ml磷酸加入995ml甲醇-水溶液(20:80), B液: 5ml磷酸加入995ml甲醇-水溶液 (80:20), 按表7-1程序洗脱; 流速: 1.0ml/min; 柱温: 40C; 检测波长: 288nm; 进样量: 10μl。